Laborategi analitikoetan,Errendimendu handiko likido kromatografia (HPLC)konposatu bereizgarriak, identifikatzeko eta kuantifikatzeko ezinbesteko teknika da. Hala ere, emaitza koherenteak eta fidagarriak lortzeak ekipamendu egokia baino gehiago behar duoptimizazio. Artikulu honetan zurea nola hobetu dezakezuen aztertzen daHPLC analisiaEraginkortasuna ahalik eta gehien aprobetxatzeko, gutxitu denbora gutxitu eta zehaztasuna hobetzeko.
Erronka arruntak HPLCren analisian eta nola konpondu
HPLC tresna analitiko indartsua den bitartean, ez da erronkarik gabe. Hala nola, gaiakebazpen eskasa, oinarri-zarata eta emaitza inkoherentealaborategiko eraginkortasuna oztopatu dezake. Hona hemen arazo ohiko hauei aurre egiteko:
1. Ebazpen eskasa
HPLCko arazo ohikoenetako bat gailurren arteko bereizketa eskasa da, askotanZutabeen aukeraketa okerra edo azpimital-fluxu tasak. Ebazpena hobetzeko:
• Aukeratu aZutabe kromatografikoadagokionarekinfase geldoa eta partikularen tamainazure analitaterentzat.
• doituFluxu-tasa eta gradiente baldintzakgailurra zorroztasuna eta bereizketa hobetzeko.
• erabiliTenperatura kontrolatzeaatxikipen-denborak egonkortzeko eta erreproduktibitatea hobetzeko.
2. Oinarrizko deriva edo zarata
Oinarrizko zaratak gailurrezko detekzioarekin eta datuen zehaztasuna arriskuan jar dezake. Gai hau maiz sortzen da:
•Tenperatura gorabeherak- Laborategi ingurune egonkorra mantendu eta erabili behar izanez gero zutabe-labea.
•Kutsatutako fase mugikorra- Erabili garbitasun handiko disolbatzaileak eta iragazi zure mugikorreko fasea erabili aurretik.
•Instrumentuen kutsadura- Aldiro garbitu eta mantendu detektagailu, ponpa eta hodiak atzeko planoko zarata murrizteko.
3. Intrimatu gabeko integrazioa
Integrazio inkoherenteak kuantifikazio fidagarritasunari eragiten dio. Hau konpontzeko:
• ziurtatuHPLC zutabea behar bezala baldintzatzen daerabili aurretik.
• mantenduFluxu tasa egonkorraeta presioaren gorabeherak saihestea.
• optimizatuIntegrazio gailuraren softwarearen ezarpenak, emaitza koherenteak eta erreproduzitzaileak bermatuz.
Eskuineko HPLC zutabea aukeratzea
HPLC zutabe egokia hautatzea dabereizketa ezin hobea lortzeko erabakigarria. Kontuan hartu faktore horiek zutabe bat aukeratzerakoan:
•Zutabeen luzera: Zutabe luzeagoak bereizketa hobea eskaintzen dute, baina azterketa-denbora areagotzen dute. Aukeratu ebazpena eta abiadura orekatzen dituen luzera.
•Zutabe diametroa: Zutabe estuagoak bereizmen handiagoa eskaintzen dute, baina presio handiagoa eskatzen dute. Ziurtatu zure HPLC sistemarekin bateragarritasuna.
•Fase geldirik: Aukeratu fase bat zure analietarako kimika egokiekin (adibidez, C18 konposatu gabeko konposatuetarako, konposatu aromatikoetarako feniloak).
Fase mugikorrak eta fluxu tasak optimizatzea
Fase mugikorra Gakoa da HPLC azterketa arrakastatsua izateko. Hona hemen nola optimizatu:
•Egokitu disolbatzaileen konposizioa: SintonizatuDisolbatzailearen erlazioabereizketa hobetzeko. ErabilpenArboladiaren gradientealagin konplexuentzat.
•Kontrolatu PH mailak: ZiurtatuPH FASE MUGIKORRAbateragarria da laginarekin eta zutabearekin.
•Optimizatu fluxu-tasa: Fluxu-tasa altuagoak analisia denbora murrizten du, baina bereizmena arriskuan jar dezake. Oreka abiadura eta eraginkortasuna zure metodoaren araberakoa da.
Mantenimendua eta prebentzio arreta
Mantentze egokia bermatzen duerrendimendu koherentea eta tresna bizia luzatzen du. Jarraitu praktika on hauek:
•Errutina garbiketa: Aldizka garbituInjektorea, zutabea eta detektagailuakutsadura ekiditeko.
•Ordezkatu kontsumigarriak: AldatuZigiluak, iragazkiak eta hodiakihesak eta presioaren gorabeherak ekiditeko behar den moduan.
•Kalibratu sistema: Aldian behin detektagailuak kalibratu eta beste osagai kritiko batzuk emaitza zehatzak bermatzeko.
Bukaera
HPLC analisia optimizatzea ezinbestekoa da laborategiko eraginkortasuna hobetzeko eta kalitate handiko emaitzak bermatzeko. Adibidez, gai arruntei aurre eginezEbazpen eskasa, oinarri-zarata eta integrazio gailurrak inkoherentziaketa eskubidea aukeratuzZutabeak eta fase mugikorrak, zure errendimendu analitikoa nabarmen hobetu dezakezu. ArauzkoMantenimendua eta metodo zaindua optimizatzeaZure HPLC sistema mantenduko du efizientzia gailurrean, geldialdiak minimizatzea eta emaitza zehatzak eta erreproduktiboak bermatzea.
Adituen orientaziorakoHPLC Optimizazioa, HarremanChromasir- Espezializatzen garaNeurrira egindako kromatografia irtenbideakzure laborategiak errendimendu estandar handienak lortzen laguntzeko.
Posta: 2012-07-27